NL5 快速深度3D共聚焦顯微鏡
利用狹縫針孔建立共聚焦成像光路
掃描速度快，避免了光漂白性和光毒性
適合深度成像，無針孔串?dāng)_現(xiàn)象
搭配普通顯微鏡，輕松升級成共聚焦顯微鏡
詳情
產(chǎn)品原理
荷蘭Confocal.nl的NL5（快速深度3D共聚焦顯微鏡）可安裝在普通熒光顯微鏡的port上，為原顯微鏡增加一個共聚焦光路，與普通的點掃描共聚焦不同的是：NL5利用狹縫針孔（slit pinhole）而不是普通針孔（pinhole）建立共聚焦成像光路，狹縫的引入可以增強信號強度，它的激發(fā)光成“棒”狀（bar）快速掃描樣本，在檢測器陣列的作用下可以實時線性成像（real time line imaging），可以極高速地進行深度3D共聚焦成像。NL5整合了狹縫針孔（slit pinhole）、前沿的數(shù)字化技術(shù)和采用極高靈敏度的sCMOS相機做檢測器，成為了可以做快速、深度3D活細胞成像的共聚焦顯微鏡系統(tǒng)。
常用的點掃描共聚焦速度有限，NL5利用狹縫針孔（slit pinhole）用線性掃描代替?zhèn)鹘y(tǒng)的點掃描達到極快的掃描速度：25fps，full frame。這樣您的樣本就不會在激光下暴露太長時間，避免了光漂白和光毒性。另外，高量子效率的現(xiàn)代化sCMOS相機的使用也使極低激光強度成為可能，因此可以得到在無光毒性和光漂白性的情況下得到高信噪比的圖像，特別適合3D活細胞長時間成像，在給樣本提供溫和的生長環(huán)境的同時，得到高分辨率和高對比度的3D圖像。
對比轉(zhuǎn)盤式共聚焦系統(tǒng)，NL5的另外的優(yōu)勢是：它的狹縫針孔（slit pinhole）使之在進行深度成像時不會引起針孔串?dāng)_（pinhole cross-talk）現(xiàn)象（轉(zhuǎn)盤式共聚焦具有多個針孔，離焦平面足夠遠的雜散光會進入相鄰的針孔，這一過程稱為針孔串?dāng)_，樣品越厚串?dāng)_影響越大）。NL5具有較高的分辨率：可以得到240nm的光學(xué)橫向分辨率，實時去卷積后可以達到170nm。和RCM（超高分辨多重掃描共聚焦顯微鏡）一樣，NL5可以搭配不同生產(chǎn)商的顯微鏡、相機和激光光源，將普通寬場熒光顯微鏡改造成快速深度3D共聚焦顯微鏡，還可以和RCM一起同時安裝在普通熒光顯微鏡上，即使整套采購也具有極高的性價比。
產(chǎn)品特點
NL5的含義即：New Line、New Light、New Live，它具有以下特點：
1. 具有單一的數(shù)字掃描頭；
2. 適合做快速深度3D活細胞成像；
3. 在深度3D成像領(lǐng)域，比轉(zhuǎn)盤式共聚焦的分辨率更高；
4. 成像亮度是轉(zhuǎn)盤式共聚焦的16倍；
5. 沒有轉(zhuǎn)盤式共聚焦的針孔串?dāng)_（pinhole cross-talk）現(xiàn)象；
6. 實時成像分辨率達到170nm（去卷積后）；
7. 更大的FOV：12.7×12.7mm；
8. 具有極快的掃描成像速度：25fps（每秒25幀），2048×2048；
9. 靈敏度極高，量子效率（QE）達到95%；
10. 狹縫針孔選擇：50mu:1.2AU@100×或20mu:1.2AU@40×；
11. 低光毒性和光漂白性，適合長時間成像；
12. 電動Bypass模式，可快速在寬場熒光顯微鏡和NL5之間切換；
13. 緊湊的設(shè)計，易于使用；
14. 開放型系統(tǒng)設(shè)計：升級您目前已有的顯微鏡，兼容多類圖像處理軟件；
15. 靈活的配置：可選擇不同生產(chǎn)商的顯微鏡、相機和激光光源進行配置；
16. 性價比高：改造成本低廉，可利用您已有的顯微鏡和配件進行改造。
廣泛的應(yīng)用
1、 成像速度快，可研究快速的細胞動態(tài)變化，光毒性極弱。應(yīng)用如：細胞遷移、細胞內(nèi)/外的傳輸、細胞信號等。
2、 長時間活細胞成像，光毒性和光漂白性均極弱。應(yīng)用如：發(fā)育生物學(xué)、再生生物學(xué)、免疫學(xué)等。
3、 深度3D成像，NL5適合長時間觀察大型的活體組織，而不會遺漏任何細節(jié)。應(yīng)用如：類器官、斑馬魚/小鼠胚胎、水凝膠的3D結(jié)構(gòu)成像，等。
4、 多色高內(nèi)涵藥物篩選：可以快速掃描96孔板，并快速確定感興趣的孔。
應(yīng)用展示
1、快速細胞動態(tài)變化的NL5成像
NL5成像速度快，可研究快速的細胞動態(tài)變化，光毒性極弱。在生物學(xué)領(lǐng)域，一些生物過程發(fā)生的非常迅速，如細胞-蛋白動態(tài)作用、細胞-細胞相互作用，所以需要快速的掃描速度。應(yīng)用如：細胞遷移、細胞內(nèi)/外的傳輸、細胞信號等。即使信號微弱，也可以對動態(tài)的結(jié)構(gòu)進行成像分析。
Hela細胞的快速3D成像：胞質(zhì)GFP，動態(tài)錄像顯示其結(jié)構(gòu)快速運動。
2、小鼠腸道腫瘤類器官NL5成像
小鼠腸道腫瘤類器官長時間成像
3、長時間活細胞NL5成像
NL5可做長時間活細胞成像，光毒性和光漂白性均極弱。應(yīng)用如：發(fā)育生物學(xué)、再生生物學(xué)、免疫學(xué)等，可以進行長達1天多的共聚焦成像，而不產(chǎn)生光毒性。
斑馬魚胚胎長時間成像：脈管系統(tǒng)的形成（24hr），內(nèi)皮細胞標記內(nèi)源性GFP。
4、深度三維NL5成像
NL5可做深度3D成像，適合長時間觀察大型的活體組織，而不會遺漏任何細節(jié)。應(yīng)用如：類器官、斑馬魚/小鼠胚胎、水凝膠的3D結(jié)構(gòu)成像，等。
NL5、NL5去卷積和轉(zhuǎn)盤式共聚焦（SDC）在不同深度的3D成像上的對比：樣本：團藻，自發(fā)熒光，激發(fā)光561nm，物鏡：100x，NA1.45，油鏡。
NL5和轉(zhuǎn)盤式共聚焦在3D成像上的對比（深度60μm），NL5圖像更明亮、更清晰。樣本：團藻，自發(fā)熒光，激發(fā)光561nm，物鏡：100x，NA1.45，油鏡。
NL5和轉(zhuǎn)盤式共聚焦在3D成像上的對比（深度90μm），NL5圖像更明亮、更清晰。樣本：團藻，自發(fā)熒光，激發(fā)光561nm，物鏡：100x，NA1.45，油鏡。
NL5在90μm深度處的成像：
5、去卷積NL5成像
NL5原始圖像和NL5去卷積圖像相對比，去卷積后圖像分辨率更高，細節(jié)更銳利。
Video
Hela細胞的快速3D成像
小鼠腸道腫瘤類器官長時間成像
斑馬魚胚胎長時間成像
