快速類器官組織微環(huán)境制備及檢測(cè)系統(tǒng)
創(chuàng)新性的微米級(jí)別的類器官組織微環(huán)境制備
用非接觸、無掩膜的光學(xué)蝕刻方法制備細(xì)胞模型
具有快速（25fps）和深度成像的共聚焦檢測(cè)
適合類器官、類器官芯片等應(yīng)用
詳情
產(chǎn)品概況
如何制備出具有可控性和重復(fù)性的類器官模型，以便更有效的進(jìn)行活細(xì)胞和疾病研究，一直是生物學(xué)家進(jìn)行類器官研究所面臨的巨大挑戰(zhàn)之一。
法國Alvéole的PRIMO是創(chuàng)新性定制細(xì)胞模型的工具，能在微米級(jí)別的尺度下，用非接觸、無掩膜的光學(xué)蝕刻方法制備細(xì)胞模型、以具有超高靈活度和再現(xiàn)性的生物工程手段實(shí)現(xiàn)體外微環(huán)境的定制，同時(shí)可對(duì)其機(jī)械力學(xué)和生化特性進(jìn)行設(shè)計(jì)微調(diào)，具有高度的靈活性、可控性和可重復(fù)性。選擇電腦中任意一張圖案，PRIMO都能將它投射到細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)上，利用非接觸式、無掩模的光刻技術(shù)，在軟件和光敏試劑的幫助下獲得任意圖案的2D蛋白涂層或3D水凝膠或微流控結(jié)構(gòu)，可用于類器官和類器官芯片的制備。
快速類器官組織微環(huán)境制備及檢測(cè)系統(tǒng)可以對(duì)以上建立的類器官及細(xì)胞模型進(jìn)行快速3D切片式共聚焦成像觀察，并進(jìn)行長時(shí)間活細(xì)胞成像觀察。
目前PRIMO系統(tǒng)在全球用戶110+。
產(chǎn)品原理
用表面蛋白涂層（Micropatterning）、水凝膠建構(gòu)（Structuration of Hydrogel）、微流道建構(gòu)（Microfabrication）方法設(shè)計(jì)類器官細(xì)胞模型和類器官芯片，用快速深度3D共聚焦技術(shù)進(jìn)行類器官細(xì)胞模型和類器官芯片的觀察和檢測(cè)。參考PRIMO原理和NL5原理。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1、步驟簡單：四步可完成：計(jì)算機(jī)圖案設(shè)計(jì)、用UV光蝕刻構(gòu)建基質(zhì)結(jié)構(gòu)、種蛋白進(jìn)行基質(zhì)功能化、將細(xì)胞接種到定制好的微環(huán)境中。
2、高靈活性：可按照任意圖案去構(gòu)建基質(zhì)和/或使其功能化，不限圖案的大小和復(fù)雜程度，只需軟件操作即可靈活改變圖案，從而生成不同的細(xì)胞模型。
3、非接觸式、無掩模UV投射：可靈活控制UV的照射強(qiáng)度、照射時(shí)間和照射區(qū)域?qū)|(zhì)進(jìn)行蝕刻、切割和固化?？梢詫?shí)時(shí)觀看蝕刻過程，及時(shí)調(diào)整和優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件。
4、適用于多種基質(zhì)：用戶可以使用任意一個(gè)常規(guī)的細(xì)胞基質(zhì)：可以是扁平的，也可以是帶有微結(jié)構(gòu)的，可以是堅(jiān)硬的也可以是柔軟的，如：玻璃蓋玻片、塑料培養(yǎng)皿、聚二甲基硅氧烷（PDMS）、聚苯乙烯、水凝膠（PEG丙烯酸酯、聚丙烯酰胺凝膠、瓊脂、基質(zhì)膠）、光刻膠，等。
5、適合多種蛋白：PRIMO的客戶日常使用超過10種的各類蛋白：Fibrinogen-488, Fibrinogen-647, Fibronectin, GFP, Neutravidin-488, Neutravidin-647, PLL-PEG-Biotin, Protein A-647, Streptavidin, 初級(jí)和次級(jí)抗體，等。
6、蝕刻高分辨率：全視野分辨率為1.2μm（ 500×300μm ，20倍物鏡）。
7、多層次：可蝕刻256個(gè)灰階層次，粘附不同密度層次的蛋白。
8、多種蛋白：可應(yīng)用3種不同蛋白（根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求），可從用戶日常使用的10多種蛋白質(zhì)中選取。
9、自動(dòng)對(duì)齊：自動(dòng)進(jìn)行檢測(cè)和圖案定位，如自動(dòng)對(duì)齊于微結(jié)構(gòu)或者微圖案上。
10、蝕刻速度快：完成整個(gè)視野中的圖案（500×300μm，20倍物鏡），僅需0.5s。
11、快速深度3D活細(xì)胞共聚焦成像，可進(jìn)行多層掃描及3D影像構(gòu)建。
12、在深度3D成像領(lǐng)域，比轉(zhuǎn)盤式共聚焦的分辨率更高，成像亮度是轉(zhuǎn)盤式共聚焦的16倍。
13、沒有轉(zhuǎn)盤式共聚焦的針孔串?dāng)_（pinhole cross-talk）現(xiàn)象。
14、實(shí)時(shí)成像分辨率達(dá)到170nm（去卷積后）。
15、更大的成像視野：12.7×12.7mm。
16、具有極快的掃描成像速度：25fps（每秒25幀），2048×2048。
17、靈敏度極高，量子效率（QE）達(dá)到95%。
18、低光毒性和光漂白性，適合長時(shí)間成像。
19、用戶友好型操作模式：短時(shí)間培訓(xùn)即可操作。
產(chǎn)品應(yīng)用
類器官應(yīng)用：
1、PRIMO可以通過水凝膠結(jié)構(gòu)化創(chuàng)建具有3D支撐作用的基質(zhì)結(jié)構(gòu)，再加上類器官發(fā)育所必需的各種細(xì)胞生長因子，將多能誘導(dǎo)干細(xì)胞或胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)形成具有三維立體結(jié)構(gòu)的各種類器官進(jìn)行功能性研究。
2、PRIMO可以將來自于患者的原代腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)成更接近于體內(nèi)形態(tài)的腫瘤球，進(jìn)行抗腫瘤藥理實(shí)驗(yàn)。
3、PRIMO還可以通過構(gòu)建類器官芯片，創(chuàng)造3D微結(jié)構(gòu)，進(jìn)行多種細(xì)胞的共培養(yǎng)，在體外模擬多個(gè)細(xì)胞相互作用的體內(nèi)運(yùn)行。
其他所有研究細(xì)胞與微環(huán)境作用的領(lǐng)域。如：
1、2D細(xì)胞微環(huán)境建構(gòu)，研究如細(xì)胞遷移/趨觸性、細(xì)胞黏附、細(xì)胞力學(xué)、細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)化培養(yǎng)、電鏡的標(biāo)準(zhǔn)化細(xì)胞觀察等。
2、3D細(xì)胞微環(huán)境建構(gòu)，研究如細(xì)胞球培養(yǎng)、類器官、組織工程等。
3、微流體芯片制作，研究如類器官芯片、細(xì)胞流體力學(xué)研究、小分子擴(kuò)散研究等。
觀察成像：
1、對(duì)以上建立的細(xì)胞模型進(jìn)行快速深度3D切片式共聚焦成像觀察，可以進(jìn)行長時(shí)間活細(xì)胞成像觀察。
2、活細(xì)胞運(yùn)動(dòng)快速成像。
3、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)快速成像，防止熒光淬滅。
4、其他快速深度共聚焦應(yīng)用等。
應(yīng)用展示
1、非粘附性基質(zhì)的細(xì)胞球標(biāo)準(zhǔn)化培養(yǎng)
下圖：上圖：光聚合的PEG水凝膠（4-arm-PEG-acryl hydrogel）槽內(nèi)的HEK細(xì)胞球。
下左圖，下中圖：共聚焦熒光顯微圖像，PEG水凝膠槽內(nèi)的小球體和雙球體。
PRIMO作用：細(xì)胞球是細(xì)胞的聚集，可以作為生理模型或復(fù)雜類器官的起始模型。非粘附性水凝膠基質(zhì)固化形成微孔，細(xì)胞種植其中形成細(xì)胞球，可形成多種細(xì)胞共培養(yǎng)、由多種蛋白調(diào)控的3D組織類器官模型。
2、粘附性基質(zhì)的細(xì)胞培養(yǎng)
下圖：PEG水凝膠通過聚合形成特定形狀，然后用交聯(lián)分子的方法進(jìn)行裝飾，允許COS-7細(xì)胞在這些結(jié)構(gòu)中生長，以模擬毛細(xì)血管（上圖）和小腸絨毛（下圖）。中列：Z軸顏色編碼的共聚焦熒光顯微鏡圖像，顯示COS-7細(xì)胞種植在凝膠上，肌動(dòng)蛋白染色。右列：Z軸用3色最大化投影顯示的共聚焦熒光顯微圖像，顯示纖連蛋白（紅色），肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架（綠色）和核膜（藍(lán)色）。
PRIMO作用：混合其他水凝膠，形成粘附性基質(zhì)，通過光固化和光剪切，使UV敏感的水凝膠形成特定形狀，表面進(jìn)行功能化，再種植細(xì)胞。
3、修飾水凝膠結(jié)構(gòu)
下圖：修飾水凝膠結(jié)構(gòu)的原理示意圖
下圖：藍(lán)色為水凝膠，紅色為黏附的纖維連接蛋白（fibronectin）。中間和右側(cè)為共聚焦圖像。
PRIMO的作用：混合惰性水凝膠和其他水凝膠，形成粘附性基質(zhì)，或改造惰性水凝膠成為粘附性基質(zhì)，再通過光固化和光剪切，使UV敏感的水凝膠形成特定形狀，表面進(jìn)行功能化，再種植細(xì)胞，可創(chuàng)造不同的細(xì)胞模型，可形成以水凝膠為骨架，多種細(xì)胞共培養(yǎng)、由多種蛋白調(diào)控的3D組織類器官模型。
4、用微制造設(shè)計(jì)“類器官芯片”（微流控芯片）
下圖：用微制造（Microfabrication）設(shè)計(jì)“類器官芯片”（微流控芯片），研究者將不同類型的細(xì)胞注射到芯片的不同的腔室/管道里，以重現(xiàn)造血干細(xì)胞的微生態(tài)環(huán)境：頂部腔室里的成骨細(xì)胞模擬骨骼成分，底部腔室里的HUVEC細(xì)胞模擬血管成分，造血干細(xì)胞被注射進(jìn)入中間的通道。
PRIMO作用：設(shè)計(jì)“類器官芯片”，創(chuàng)造共培養(yǎng)微環(huán)境，在體外模擬多個(gè)細(xì)胞相互作用的體內(nèi)運(yùn)行。
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PRIMO 整體介紹視頻
