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產(chǎn)品原理

澳大利亞OptiScan活體共聚焦成像系統(tǒng)使用光纖的尖端作為空間濾波器，使之小型化。系統(tǒng)內(nèi)部的藍(lán)色激光（488nm）通過光纖到達(dá)一個靈活手持式的探頭。探頭中的光學(xué)裝置將激光聚焦到組織中的一個點(diǎn)上用以激發(fā)熒光。發(fā)射光（＞510nm）被捕獲到光纖中，并通過濾光片進(jìn)入探測器。通過掃描整個圖像平面上的焦點(diǎn)和收集點(diǎn)強(qiáng)度的測量值來生成圖像。圖像平面還可以在樣本中上下平移，從而生成3D圖像棧。

整體介紹

       澳大利亞OptiScan的Viewn Vivo是Fluorescence In Vivo Endomicroscope 2nd generation（第二代活體熒光內(nèi)鏡）的縮寫，是一類活體共聚焦顯微鏡。OptiScan ViewnVivo? (FIVE2)“動物活體共聚焦成像系統(tǒng)”采用了手持探頭式成像方式，可以觀測任何它接觸的組織，生成高分辨率的共聚焦圖像，活體動物層面的分辨率可高達(dá)0.55微米級別，可在活體動物層面觀察到組織或細(xì)胞的病理切片信息，細(xì)胞或亞細(xì)胞級別的染色信息，以及抗體表達(dá)、熒光染料、納米粒子的分布情況等。

產(chǎn)品特點(diǎn)

1. 最小0.5微米級別分辨率，可直接觀察到活體的組織和細(xì)胞情況；

2. 深度最高可達(dá)400μm，可進(jìn)行不同層面掃描成像并合成3D結(jié)果；

3. 探頭式成像，成像角度和位置更靈活，可觀察更多切面；

4. 可進(jìn)行實(shí)時動態(tài)采集，設(shè)置幀頻采集速度并進(jìn)行長時間采集；

5. 采用熒光成像的方式，可選用多種商業(yè)化的熒光探針，易標(biāo)記；

6. 操作簡單，無需復(fù)雜設(shè)置參數(shù)， 無需專門人員負(fù)責(zé)。

為何選擇Viewn Vivo？

1. 極佳的分辨率：使用遠(yuǎn)端單一掃描纖維而不是近端放置掃描纖維束提供無與倫比的橫向和軸向分辨率。單一纖維消除了成像盲區(qū)和斷裂纖維的問題，提供高靈敏度和長壽命。

2. 永不錯過您的圖像：ViewnVivo?成像軟件包括圖像回滾功能。用戶可以從最多60幀內(nèi)存中選擇和保存圖像。單個圖像或圖像選擇可以保存或制作成視頻文件。用于縱向研究。

3. 縱向研究：高水平的消毒和滅菌方案提供了一種具有成本效益的實(shí)用方法，可以對同一主題進(jìn)行縱向研究，以及對細(xì)胞培養(yǎng)物和其他需要無菌的樣品進(jìn)行成像。

4. 長壽命的探頭：ViewnVivo?探頭不是消耗品，將通過長期的操作和數(shù)百個程序來保持其成像質(zhì)量。

5. Z軸的精準(zhǔn)調(diào)控：ViewnVivo?顯示微米精度的焦平面位置。成像軟件提供了一個直觀的界面來設(shè)置和收集Z軸的圖像數(shù)據(jù)。這些數(shù)據(jù)可以被制作成視頻或轉(zhuǎn)移到Fiji進(jìn)行處理。

6. 任意角度成像：靈活的手持式探頭允許用戶對以前無法成像的樣本進(jìn)行成像。
   

廣泛的應(yīng)用領(lǐng)域

主要的應(yīng)用領(lǐng)域：

1. 肝臟、腎臟、大腦、腫瘤等實(shí)質(zhì)性臟器的成像及顯微觀察；

2. 口腔、呼吸道、胃腸道等腔道成像及顯微觀察；

3. 活體動物層面觀察組織或細(xì)胞的病理切片信息；

4. 細(xì)胞的染色信息及抗體表達(dá)情況；

5. 熒光染料、納米粒子的分布示蹤；

6. 血管微循環(huán)信息。

• 腫瘤學(xué)研究：

腫瘤發(fā)生和凋亡、腫瘤轉(zhuǎn)移、腫瘤偵測和診斷、腫瘤邊界探測等；

• 組織再生研究：

干細(xì)胞研究、組織工程學(xué)、組織免疫、類器官等；

• 細(xì)胞追蹤應(yīng)用：

干細(xì)胞研究；炎癥反應(yīng)；細(xì)胞間或細(xì)胞與組織的相互作用等；

• 光動力學(xué)治療應(yīng)用：

光敏劑的分布；光動力學(xué)反應(yīng)；損傷檢測和識別等；

• 感染和治療研究：

組織微生物和殺菌劑反應(yīng)等；

• 藥物研究：

藥代動力學(xué)、組織的藥物反應(yīng)等；

• 病理學(xué)研究：

急性肺損傷模型、肝病模型、疾病所致組織形態(tài)學(xué)變化等；

• 微血管研究：

微血管動力學(xué)和結(jié)構(gòu)、血管新生或抗血管生成、血栓形成等；

• 動物模型研究：

組織損傷或疾病研究等；

• 分子成像應(yīng)用：

受體標(biāo)簽；蛋白表達(dá)分析；轉(zhuǎn)基因動物（如GFP/YFP）等；

• 運(yùn)動系統(tǒng)疾病研究：

韌帶和肌腱纖維結(jié)構(gòu)成像等。

1、口腔癌OptiScan成像

左：正常組；中：癌前期組；右：癌變組。

注：Optiscan技術(shù)可以實(shí)時捕捉口腔黏膜的亞細(xì)胞細(xì)節(jié)，而無需進(jìn)行活組織檢查。Scale bar=100μm。

2、宮頸癌OptiScan成像

左：正常鱗狀上皮；右：宮頸上皮肉瘤變。

注：0.05%吖啶黃溶液外用。Scale bar=100μm。

3、腫瘤血管生成OptiScan成像

左：正常皮膚微脈管系統(tǒng)；右:黑色素瘤影響的皮膚微脈管系統(tǒng)。

注：活體CLE成像顯示無胸腺小鼠植入黑素瘤內(nèi)及周圍的黑素瘤相關(guān)脈管系統(tǒng)發(fā)生變化，靜脈注射(0.3 ml, 10 mg / ml)fitc-葡聚糖作為造影劑。Scale bar=100μm。

4、自體熒光OptiScan成像

左：ACL中有序的膠原纖維；右：ACL中過度負(fù)荷后的無序膠原纖維。

注：前交叉韌帶(ACL)的自體熒光成像。本研究著眼于疲勞相關(guān)微損傷導(dǎo)致的前交叉韌帶失效。Scale bar=100μm。

5、肺內(nèi)皮三重標(biāo)記OptiScan成像

造影劑：

肺內(nèi)皮細(xì)胞核:吖啶橙，0.05%靜脈注射(單箭頭)；

血漿:熒光素葡聚糖70kDa，靜脈注射(雙箭頭)；

遠(yuǎn)端上皮膜:FITC-R。普通的植物血凝素。（三箭頭）。Scale bar=100μm。

6、胃腸道微生物OptiScan成像

注：0.05%吖啶黃染色犬細(xì)胞胃內(nèi)幽門螺桿菌?？捎^察到活的微生物。

7、斑馬魚眼部血管OptiScan成像

左：成像深度：250 μm，表達(dá)GFP的斑馬魚血管內(nèi)皮成像；

右：最明亮的一張；Scale bar=100μm。

左：成像深度：180μm，表達(dá)GFP的斑馬魚血管內(nèi)皮成像，吖啶黃用作背景造影；

右：最明亮的一張，在Image J里深度顏色編碼。Scale bar=100μm。

8、腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤OptiScan成像

注：活大鼠腦中被滲漏血管包圍的腫瘤病灶。該腫瘤為惡性膠質(zhì)瘤，浸潤性強(qiáng)，可引起出血。這里使用的造影劑是靜脈注射熒光素。在本實(shí)驗(yàn)中，注射了IV熒光素。它分布在整個動物周圍，可以看到血液通過血管流動。為此，頭骨需要被打開或變薄。大型動物的硬腦膜也需要手術(shù)打開。Scale bar=100μm。